Catalase

La catalase est une enzyme catalysant la dismutation de l'eau oxygénée ...



Catégories :

Microbiologie - Bactériologie - Hémoprotéine - EC 1.11.1 - Catalyse - Cinétique chimique - Chimie générale

Définitions :

Réaction de la catalase

La catalase est une enzyme (N° EC 1.11.1.6) catalysant la dismutation de l'eau oxygénée (peroxyde d'hydrogène)  :

2H2O2 → O2 + 2H2O

Elle est constituée de quatre chaînes polypeptidiques d'environ 500 acides aminés, comportant chacune un groupe hème. Ces hèmes et leur environnement protéique sont les sites actifs de cette enzyme. Pour catalyser la réaction, l'atome de fer du groupement hème de la catalase réalise une coupure hétérolytique de la liaison O-O du péroxyde d'hydrogène, créant par conséquent une molécule d'eau et un groupement Fe (IV) =O hautement oxydant ; ce dernier peut ensuite oxyder une autre molécule de péroxyde d'hydrogène pour donner du dioxygène. Ce processus est illustré plus particulièrement par les équations suivantes :

H2O2 + Fe (III) -E → H2O +O=Fe (IV) -E (1)

H2O2 + O=Fe (IV) -E → O2 + Fe (III) -E +H2O (2)


Avec une vitesse maximale de 200 000 réactions catalytiques par seconde, elle est une des enzymes les plus efficaces connues. Sa vitesse de réaction ne semble en effet limitée que par la diffusion, c'est-à-dire par la vitesse limite avec laquelle les molécules parviennent au site actif de l'enzyme. Chez les eucaryotes on la trouve dans le peroxysome des cellules.

On trouve la catalase chez l'ensemble des organismes aérobies et surtout dans les navets ou dans la majorité des racines des plantes, dans la levure et dans le foie des animaux.

Usage en microbiologie

Cette enzyme est utilisée en bactériologie systématique pour l'identification des bactéries. Il s'agit de mettre en contact une colonie de la bactérie à étudier en présence d'eau oxygénée (à 10 volumes). Une effervescence (dû à un dégagement de dioxygène) signe la présence d'une catalase.

La plupart des bactéries à gram négatif possédent une catalase (catalase +). La recherche de la catalase sur ce type de bactéries ne présente par conséquent aucun intérêt, sauf un sérovar de Shigella dysenteriæ. Pour les bactéries à Gram positif, la recherche de cette enzyme sert à différencier :


Technique

Remarques : Ne pas utiliser d'anse de platine, car elle réagit avec H2O2 et donne un faux positif. Il est déconseillé de faire ce test à partir d'un bouillon de culture ensemencé, car le résultat est moins net. En cas de doute sur le résultat, recommencer avec une plus grosse colonie.


Rôle du test "catalase" dans l'identification d'une espèce

Ce test est important pour la première orientation dans l'identification d'une souche pure bactérienne.

Pour effectuer l'identification complète d'une bactérie il faut connaître le type respiratoire. Les bactéries Gram + possèdent pour la majorité un type respiratoire aéro-anaérobie facultatif, sauf le genre Microccocus (type aérobie strict).

Il faudra par conséquent poursuivre l'identification de la souche par l'ensemencement de milieux : sélectifs, hostiles, ou faisant partie de la batterie de test prévue pour la différenciation des genres et l'identification de la bactérie. exemple : Recherche de la voie d'attaque du glucose.

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La version présentée ici à été extraite depuis cette source le 30/11/2010.
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